人妻丰满熟妇AV无码区不卡,亚洲日韩精品欧美一区二区一,丰满岳乱妇在线观看,免费无码国产V片在线观看

當(dāng)前位置:
首頁 > 技術(shù)文章 > 石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟
目錄導(dǎo)航 Directory
技術(shù)支持Article
石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟
點(diǎn)擊次數(shù):2501 更新時(shí)間:2019-03-13

 

石蠟包埋組織切片免疫染色

 

 

實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):

石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度

1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;

2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;

3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2 min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O洗2×2min;

4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。

5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;

6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜;

7.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min);

8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;

9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min;

10.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min);

11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;

12.加HRP-SA: 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37℃濕盒中孵育30 min;

13.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min),TBS洗滌(2×5 min);

14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;

15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;

16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;

17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。

注意事項(xiàng):

1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。

2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。

3. 若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。

4. 封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween 20,否則會(huì)影響結(jié)果觀察。

5. 如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。

 

 

免疫組化實(shí)驗(yàn)代做報(bào)價(jià)
WB實(shí)驗(yàn)代做報(bào)價(jià)

CCK8檢測(cè)實(shí)驗(yàn)代做報(bào)價(jià)

 

 

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

厨房挺进紧致班主任少妇| 中文字幕在线无码一区二区三区| 久久久受WWW免费人成| 无码人妻少妇久久中文字幕| 秘书被老板CAO到合不拢腿| 亚洲国产精品无码成人片久久| 少妇无码久久一区二区三区| 亚洲欧洲日产V| 特级毛片A级毛片免费观看网站| 国产真实乱对白精彩| 丰满女人又爽又紧又丰满| 18禁黄污吃奶免费看网站| 免费无码国产V片在线观看| 日韩精品无码一区二区三区免费| 熟女人妻少妇精品视频| 中国成熟妇女毛茸茸| 无码无遮挡刺激喷水视频| 97色伦图片97综合影院| 精品国产一区二区三区不卡| 色婷婷AV视频一二三区小说| 精品无码三级在线观看视频| 人妻熟女一二三区夜夜爱| 狂性XXXX乱大交老女人| 中文字幕一区二区三区日韩精品| 夜夜躁狠狠躁日日躁AAB| 久久久久久A片免费播放| 久久久精品人妻一区二区三区四区| 色狠狠色狠狠综合天天| 一本一本久久A久久精品综合麻豆| 囗交50个动态图片| 人妻人人揉人人躁人人A片| 日本熟妇人妻xxxx| 无码中文人妻在线一区二区三区| 精品国模一区二区三区| 破外女13一14在线观看| 欧美精品色婷婷五月综合| 欧美午夜精品久久久久久| 亚洲国产精品综合久久网各| 日日噜噜夜夜狠狠久久无码区| H女主从小被C到大1V1| 在公交车上弄到高C小时说杨震|