人妻丰满熟妇AV无码区不卡,亚洲日韩精品欧美一区二区一,丰满岳乱妇在线观看,免费无码国产V片在线观看

當(dāng)前位置:
首頁(yè) > 資料下載 > 磷脂酶 A2(phospholipase A2,PLA2)試劑盒說明書微量法
目錄導(dǎo)航 Directory
資料下載Down

磷脂酶 A2(phospholipase A2,PLA2)試劑盒說明書微量法

提 供 商: 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司 資料大小:
圖片類型: 下載次數(shù): 0 次
資料類型: PDF 瀏覽次數(shù): 86次
相關(guān)產(chǎn)品:
文件下載    
詳細(xì)介紹

磷脂酶 A2(phospholipase A2,PLA2)試劑盒說明書

微量法

注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂酰基水解酶,廣泛存在于動(dòng)植物組織、細(xì)菌、細(xì)胞核分泌物中,參與脂肪消化,精子成熟、細(xì)胞信號(hào)傳遞、脂質(zhì)過氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過程,在控制體內(nèi)磷脂類物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。

測(cè)定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸膽堿(HEPC)產(chǎn)生游離巰基,與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì),在412nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、超速冷凍離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板。

試劑組成和配制

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體×5 瓶,-20℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加入 1.8mL 試劑二充分混勻。(3天使用完)

樣品處理

1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心5min,取全部上清于4℃、100000g離心30min,棄上清,取沉淀溶于1mL試劑一。

2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后于4℃,10000g 離心5min,取全部上清于4℃、100000g 離心 30min,棄上清,取沉淀溶于1mL試劑一。

3. 血清:直接測(cè)定。

測(cè)定操作


對(duì)照管

測(cè)定管

樣品(μL)

20

20

試劑二(μL)

180


試劑三(μL)


180

充分混勻,37℃反應(yīng) 10min,于微量石英比色皿/96 孔板,蒸餾水調(diào)零,測(cè)定 412nm 處吸光值,記為 A 對(duì)照管和 A 測(cè)定管,△A=A 測(cè)定管- A 對(duì)照管

 

計(jì)算公式

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1.按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義:每毫克蛋白每分鐘水解HEPC產(chǎn)生1nmol游離巰基所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

PLA2 活性(nmol/min/mg protε×d)×反總÷(樣×Cpr)÷T

= 73.53×△A÷Cpr

2.按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義:每克組織每分鐘水解HEPC產(chǎn)生1nmol游離巰基所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

PLA2 活性(nmol/min/gε×d)×反總÷(W×V 樣÷樣總)÷T

= 73.53×△A÷W

3. 細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義:每104個(gè)細(xì)胞每分鐘水解HEPC產(chǎn)生1nmol游離巰基所需的酶量為一個(gè)酶活力

單位。

PLA2 活性(nmol/min/104cellε×d)×反總÷(樣×細(xì)胞數(shù)量÷樣總)÷T= 73.53×△A÷細(xì)胞數(shù)量

4 按照液體體積計(jì)算

酶活性定義:每毫升血清每分鐘水解HEPC產(chǎn)生1nmol游離巰基所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

PLA2 活性(nmol/min/mLε×d)×反總÷樣÷T= 73.53×△A

εTNB 消光系數(shù),13600L/mol/cmd:比色皿光徑,1cm反總:反應(yīng)總體積,1mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.1mL;W:樣本質(zhì)量,g;V 樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,10min

b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1.按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義:每毫克蛋白每分鐘水解HEPC產(chǎn)生1nmol游離巰基所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

PLA2 活性(nmol/min/mg protε×d)×反總÷(樣×Cpr)÷T

=147.06×△A÷Cpr

2.按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義:每克組織每分鐘水解HEPC產(chǎn)生1nmol游離巰基所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

PLA2 活性(nmol/min/gε×d)×反總÷(W×V 樣÷樣總)÷T

= 147.06×△A÷W

3. 細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義:每104個(gè)細(xì)胞每分鐘水解HEPC產(chǎn)生1nmol游離巰基所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

PLA2活性(nmol/min/104cellε×d)×反總÷(V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)÷T=147.06×△A÷細(xì)胞數(shù)量

4 按照液體體積計(jì)算

酶活性定義:每毫升血清每分鐘水解HEPC產(chǎn)生1nmol游離巰基所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

 

PLA2 活性(nmol/min/mLε×d)×反總÷樣÷T

= 147.06×△A

εTNB 消光系數(shù),13600L/mol/cmd:比色皿光徑,0.5cm反總:反應(yīng)總體積,1mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.1mL;W:樣本質(zhì)量,g;V 樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,10min

從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十余年,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

 

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):

 



滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

国产成人精品一区二三区在线观看| 日韩精品无码熟人妻视频| 国产精品素颜系列| 国模丰满少妇私拍| 国产精品无码电影在线观看| 成人性生交大片免费看京东小视频| 够力七星彩排列五奖表最新版本| 亚洲乱码一区二区三区在线观看| 亚洲人成无码网站在线观看| 2012国语高清完整版在线观看| 久久久久久精品免费免费999| 熟妇人妻AV无码一区二区三区| 丁香花在线观看免费观看| 东北妇女肥胖BBWBBWBBW| 少妇AAA级久久久无码精品片| 一本色道久久88亚洲精品综合| 无码精品一区二区三区在线| 久久国产精品免费一区二区三区| 粗大猛烈进出高潮视频免费看| 和朋友换娶妻3怎么看| 久久久免费看黄A级毛片高清| 免费真人视频APP| 精品一区二区久久久久久久网站| 福利COSPLAYH裸体の福利| 我和闺蜜在KTV被八人伦| 国模无码大尺度一区二区三区| 全免费A级毛片免费看| 男人又粗又大女人舒服吗| 女仆穿白丝裸体吃奶玩乳视频| 精品少妇高潮蜜臀涩涩AV| 欧美性1生交XXXXX无码| 精品国产一区二区三区久久久狼| 短篇公交车高H肉辣全集目录| 强辱丰满的人妻HD高清中文字幕| 高H各种PLAY全肉快穿NP| 捏胸吻胸添奶头GIF动态图| 一本色道久久综合亚洲精品蜜桃冫| 6080YYY午夜理论AA片| 日日天干夜夜狠狠爱| 免费无码国产欧美久久18| 久久夜色精品国产噜噜麻豆|